Real-time PCR hay còn gọi là Quantitative real-time PCR (qPCR) là một phương pháp vô cùng hiệu quả và thường được sử dụng để định lượng mức độ biểu hiện gen. Phương pháp này sử dụng các công nghệ dễ tiếp cận, người thực hiện dù chưa từng tiếp xúc vẫn có thể nhanh chóng hiểu nguyên tắc và dễ dàng thông thạo. Tuy nhiên, trước khi có một quy trình real-time PCR hoàn chỉnh, dễ sử dụng nhất cho các kỹ thuật viên, thì các nhà nghiên cứu và phát triển cần trải qua nhiều bước tìm hiểu, thiết kế và tối ưu hóa phản ứng, nhằm đảm bảo dữ liệu thu được có chất lượng cao cũng như kết quả độ lặp lại tốt nhất.